تکثیر، کلونینگ و بیان ژن bp۲۶((omp۲۸ brucellamelitensis بومی استان مرکزی به منظور تولید پروتئین نو ترکیب bp۲۶
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کنندهای است که هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل میکند. بنابراین استفاده از بهترین، دقیقترین و به صرفهترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری میباشد. عامل شایع بروسلوز در ایران بروسلا بوده و پروتئین bp26این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتری بروسلا جهت استفاده در کیت تشخیص بروسلوز میباشد. مواد و روشها: در این مطالعه ﺑﻨﯿﺎدی - ﮐﺎرﺑﺮدی، از باکتری کشت شده، تخلیص dna ژنومیک به روش پروتئیناز k و فنل/کلرفرم انجام شد. سپس با توجه به اطلاعات توالی ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن، برای ژن مذکور پرایمر طراحی شده و واکنش زنجیره ای پلیمراز راهاندازی، بهینهسازی و انجام شد. در ادامه محصول واکنش ابتدا در وکتور ptz57r/t الحاق گردید و پس از آن در وکتور pet-28a کلون گردید. وکتور نوترکیب به میزبان e. coli bl21(de3) منتقل گردید و پروتئین نوترکیب و با ستون کروماتوگرافی ni-nta علیه his tag تخلیص گردید. یافتهها: اندازه ژن تکثیر شده با اندازه بخشی از ژن bp26 brucella melitensis موجود در بانک اطلاعات ژن مطابقت داشت. ژن bp26 بدون القاء با iptg به میزان کم بیان شده و با افزودن آن به غلظت 1 میلیمولار به محیط کشت در ساعت سوم، حداکثر بیان مشاهده شد. نتیجهگیری: تولید پروتئین نوترکیب bp26 از باکتری ملیتنسیس بومی استان مرکزی با استفاده از ناقل پلاسمیدی pet-28a امکانپذیر گردید. با توجه به اهمیت این پروتئین و به منظور بررسیهای بیشتر در آینده در خصوص تهیه کیت تشخیص بروسلوز، امکان تولید آن در کشور فراهم شد.
منابع مشابه
تکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp۲۶( omp۲۸ )باکتری b. melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین bp۲۶
مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران b. melitensis بوده و پروتئین bp26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین bp26 نوترکیب از باکتریb. melitensis توسط وکتور بیانیpet-2...
متن کاملتکثیر ،کلونینگ و بیان ژن نوترکیب bp26( omp28 )باکتری B. Melitensisجدا شده از استان مرکزی و تخلیص پروتئین BP26
مقدمه و هدف: بروسلوز بیماری ناتوان کننده ای است که و هزینه گزافی را بر اقتصاد و اجتماع تحمیل می کند . بنابراین استفاده از بهترین ، دقیق ترین و به صرفه ترین روش برای تشخیص این بیماری ضروری می باشد . عامل شایع بروسلوز در ایران B. melitensis بوده و پروتئین BP26 این باکتری خاصیت آنتی ژنیسیته خوبی دارد. بنابراین هدف از این تحقیق تولید پروتئین BP26 نوترکیب از باکتریB. Melitensis توسط وکتور بی...
متن کاملکلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده BMP-2 انسانی در باکتری E. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب
Introduction & Objective: Bone morphogenetic proteins are a group of cytokines that belongs to superfamily TGFβ. These proteins play an important role in evolution of many of organs and tissues through germinal period followed by amending and rebuilding of bone tissue and car-tilage. The aim of this study was to clone and expression analysis of BMP-2 gene in E. coli bacteria. Materials & Method...
متن کاملموتاسیون هدف مند، کلونینگ و بیان پروتئین استرپتوکیناز به منظور تولید مولکول جدید مناسب برای پگیلاسیون
زمینه و هدف: استرپتوکیناز رایج ترین و در حال حاضر مقرون به صرفه ترین داروی فیبرینولیتیک برای درمان سکته های قلبی و گرفتگی رگ ها می باشد. علی رغم مزایا و برتری هایی که استرپتوکیناز نسبت به داروهای ترومبولیتیک دیگر دارد، تجویز آن می تواند با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی بدن و هموراژی همراه بوده و هم چنین نیمه عمر نسبتا پایین آن منجر به درمان ناقص شود. پگیلاسیون یکی از روش های رایج برای اصلاح...
متن کاملکلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین SNAP-25
Background & Objectives:Clostridial neurotoxin inhibits neurotransmitter release by selective and specific intracellular proteolysis of synaptosomal associated protein of 25KDa (SNAP-25), synaptobrevin/VAMP-2 and syntaxin. SNAP-25 is one of the components that forms docking complex in synaptic ends. This protein is subtrate for botulinum neurotoxins types A,C, and E. Each of these toxin serotyp...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراکجلد ۱۶، شماره ۳، صفحات ۰-۰
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023